Isolation, cultivation and characterization of CD133+ stem cells from human glioblastoma

Isolation, cultivation and characterization of CD133+ stem cells from human glioblastoma

Alternative title Isolamento, cultivo e caracterização de células-tronco CD133+ de glioblastoma humano
Author Pavon, Lorena Favaro Google Scholar
Marti, Luciana Cavalheiro Google Scholar
Sibov, Tatiana Tais Google Scholar
Miyaki, Liza Aya Mabuchi Google Scholar
Malheiros, Suzana Maria Fleury Autor UNIFESP Google Scholar
Mamani, Javier Bustamante Google Scholar
Brandt, Reynaldo Andre Google Scholar
Ribas, Guilherme Carvalhal Google Scholar
Pagura, Jorge Roberto Google Scholar
Joaquim, Marcos Augusto Stavale Google Scholar
Feres Junior, Hallin Google Scholar
Gamarra, Lionel Fernel Google Scholar
Institution Hospital Israelita Albert Einstein Instituto do Cérebro
Hospital Israelita Albert Einstein Centro de Pesquisa Experimental
Hospital Israelita Albert Einstein Faculdade de Enfermagem
Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP)
Hospital Israelita Albert Einstein Center for Neuro-oncology
Hospital Israelita Albert Einstein
Abstract OBJECTIVE: To establish the method of isolation and culture of human glioblastoma neurospheres, and the purification of their stem cells, followed by the process of obtaining tumor subspheres, immunophenotypically characterizing this clonogenic set. METHODS: Through the processing of glioblastoma samples (n=3), the following strategy of action was adopted: (i) establish primary culture of glioblastoma; (ii) isolation and culture of tumor neurospheres; (iii) purify cells that initiate tumors (CD133+) by magnetic separation system (MACS); (iv) obtain tumor subspheres; (v) study the expression of the markers nestin, CD133, and GFAP. RESULTS: The study successfully described the process of isolation and culture of glioblastoma subspheres, which consist of a number of clonogenic cells immunophenotypically characterized as neural, which are able to initiate tumor formation. CONCLUSION: These findings may contribute to a better understanding of the process of gliomagenesis.

OBJETIVO: Estabelecer o método de isolamento e cultivo das neuroesferas de glioblastoma humano, bem como purificação de suas células-tronco, seguido do processo de obtenção de subesferas tumorais, caracterizando imunofenotipicamente esse conjunto clonogênico. MÉTODOS: Por meio do processamento de amostras de glioblastomas (n=3), cumpriu-se a seguinte estratégia de ação: (i) estabelecimento da cultura primária de glioblastoma; (ii) isolamento e cultura de neuroesferas tumorais; (iii) purificação das células que iniciam os tumores (CD133+) por sistema de separação magnética (MACS); (iv) obtenção subesferas tumorais; (v) estudo da expressão de marcadores GFAP, CD133 e nestina. RESULTADOS: Este estudo descreveu com sucesso o processo de isolamento e cultivo de subesferas de glioblastoma, as quais são constituídas por um conjunto clonogênico de células caracterizadas imunofenotipicamente como neurais, capazes de iniciar a formação tumoral. CONCLUSÃO: Estes achados poderão contribuir para a compreensão do processo de gliomagênese.
Keywords Glioblastoma
Cell culture
Neoplastic stem cells
Antigens
Glioblastoma
Cultura celular
Células-tronco neoplásicas
Antígenos
Language English
Sponsor Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)
Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq)
Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES)
Date 2012-06-01
Published in Einstein (São Paulo). Instituto Israelita de Ensino e Pesquisa Albert Einstein, v. 10, n. 2, p. 197-202, 2012.
ISSN 1679-4508 (Sherpa/Romeo)
Publisher Instituto Israelita de Ensino e Pesquisa Albert Einstein
Extent 197-202
Origin http://dx.doi.org/10.1590/S1679-45082012000200013
Access rights Open access Open Access
Type Article
SciELO ID S1679-45082012000200013 (statistics in SciELO)
URI http://repositorio.unifesp.br/handle/11600/7157

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