Expressão gênica de RANK/RANKL/OPG em uma cultura tridimensional de fibroblastos periodontais humanos em membranas de quitosana e xantana

Expressão gênica de RANK/RANKL/OPG em uma cultura tridimensional de fibroblastos periodontais humanos em membranas de quitosana e xantana

Author Faria, Andrea Cristina Baptista Coelho De Autor UNIFESP Google Scholar
Advisor Ferreira, Lydia Masako Autor UNIFESP Google Scholar
Institution Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP)
Graduate program Cirurgia Translacional
Abstract Introduction: The cultivation of periodontal ligament fibroblasts, associated with the simulation of compression loads or tension on the cell, allows to analyze the changes in its morphology and to identify the expression of proteins and molecules. The system formed by kB nuclear factor activating receptor (RANK) proteins, kB nuclear factor activating receptor (RANKL) and osteoprotegerin (OPG) proteins are directly linked to bone remodeling, bone formation and resorption. Objective: To evaluate RANK/RANKL and OPG gene expression in three-dimensional human periodontal fibroblasts culture in chitosan and xanthan membranes. Methods: Immortalized human periodontal fibroblasts were expanded, cells were divided into two groups: Control Group (CG), with threedimensional culture without load application for 6h and Experimental Group (GE1, GE2, GE3 and GE4), with culture three-dimensional with load application of 4, 12, 24, and 48 g/cm 2 for 6h. Cell mRNA was extracted from all groups and evaluated by the TaqMan Probe Real Time Polymerase Chain Reaction method. Results: There was no expression of RANK/RANKL, but there was expression of OPG, being significantly higher in GE2 compared to GC, GE1, GE3 and GE4. Conclusion: The load of 12g/cm2 for 6 hours in three-dimensional periodontal fibroblast culture showed higher OPG expression.

Introdução: O cultivo de fibroblastos do ligamento periodontal, associada à simulação de cargas de compressão ou tensão sobre a célula, permite analisar as modificações na sua morfologia e identificar a expressão de proteínas e moléculas. O sistema formado pelas proteínas receptor ativador de fator nuclear κB (RANK), receptor ativador de fator nuclear κB Ligante (RANKL) e a osteoprotegerina (OPG) está diretamente ligado à remodelação óssea, na formação e reabsorção do tecido ósseo. Objetivo: Avaliar a expressão gênica de RANK\RANKL e OPG na cultura tridimensional de fibroblastos periodontais humanos em membranas de quitosana e xantana. Métodos: Foram utilizados fibroblastos periodontais humanos imortalizados. As células foram distribuídas em dois grupos: Grupo Controle (GC), com cultivo tridimensional sem aplicação de carga durante 6h e Grupo Experimental (GE1, GE2, GE3 e GE4), com cultivo tridimensional com aplicação de carga de 4, 12, 24, e 48g/cm 2 respectivamente durante 6h. O RNAm das células foi extraído de todos os grupos e avaliados pelo método de Reação em Cadeia de Polimerase em Tempo Real PCR por sonda TaqMan. Resultados: Não houve a expressão de RANK/RANKL, mas houve a expressão de OPG, tendo sido significativamente maior no GE2 em comparação GC, GE1, GE3 e GE4. Conclusão: A carga de 12g/cm2 por 6 horas em cultura tridimensional de fibroblastos periodontais apresentou maior expressão de OPG.
Keywords Gene Expression
RANK/RANKL/OPG
Expressão Gênica
RANK/RANKL/OPG
Fibroblastos
Language Portuguese
Date 2019-11-30
Research area Cultura E Terapia Celular E Células Tronco Aplicadas A Cirurgia
Knowledge area Regeneração Tecidual Ecto E Mesodérmica
Publisher Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP)
Extent 7 p.
Origin https://sucupira.capes.gov.br/sucupira/public/consultas/coleta/trabalhoConclusao/viewTrabalhoConclusao.jsf?popup=true&id_trabalho=7846904
Access rights Closed access
Type Thesis
URI https://repositorio.unifesp.br/handle/11600/59579

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