Métodos de esterilização para scaffold natural usado em engenharia tecidual

Métodos de esterilização para scaffold natural usado em engenharia tecidual

Author Iwamoto, Luciana Aparecida De Sousa Autor UNIFESP Google Scholar
Advisor Duailibi, Silvio Eduardo Autor UNIFESP Google Scholar
Institution Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP)
Graduate program Cirurgia Translacional
Abstract Tissue Engineering (TE) is a multidisciplinary science dedicated to producing organs and human parts replaced by traumatic lesions, degenerative diseases or agenesis. One of its stages is the production of biocompatible frameworks for application in Regenerative Medicine. These structures are known as scaffolds, they are similar to the original tissue in texture and porosity. Moreover, it drives the behavior of the cells that will be sown, leading to a construct. The treatment of extensive losses is very difficult and challenging, as the complete recovery of the anatomical and functional integrity of damaged tissues not only provides physical and psychological improvement but also can mean the survival of the patients. The use of natural scaffolds involves the removal of living cells from the organ/tissue and let it read to be implanted in humans, and its biosafety implies being sterile, and with its macro and micro-geometry preserved.Objective: Evaluate the efficiency of sterilization after demineralization and decellularization of the teeth, enabling them as natural scaffolds. Methods: The samples were submitted to demineralizing/decellularising solutions in sequence sterilizing them. All of them were processed with 28% EDTA, 9% hydrogen peroxide, enzymatic detergent; they were divided into 5 groups: G1 - control, G2 - sterilization with dry heat, G3 - sterilization with autoclave, G4 - sterilization with ethylene oxide; G5 - sterilization with Gamma radiation. The evolution of demineralization and decellularization was accompanied by weighing, analytical techniques SEM (Scanning Electron Microscopy), optical images and radiography. Samples were weighed before and after the sterilization process. The sterility test evaluation were performed to evaluate the microbial growth. The results were statistically analyzed by Friedman, Kruskal-Wallis, Qui- Resumo square test and Fisher's exact test. The level of rejection of the null hypothesis was set at 0.05 or 5%. The presented results indicates all the 4 sterillization methods presented equivalent good performance, radiographically there were no evident advantage for any of them. At groups G2 and G4 the color of the samples did not change, while in group G3 the root portion became yellowish and in G5 the coronary portion became greyed. In G5, the microhardness test presented lower levels. Conclusion: Although the demineralization/decellularization processes are not sufficient to eliminate all microorganisms present in the evaluated samples, the sterilization processes performed have been shown to be effective in eliminating the bioburden.

Introdução: A Engenharia Tecidual (ET) é uma ciência multidisciplinar que visa produzir órgãos e partes humanas substitutas acometidas por lesões traumáticas, doenças degenerativas ou agenesias. Uma das suas etapas é a produção de arcabouços biocompatíveis para aplicação na Medicina Regenerativa. Estas estruturas são conhecidas como scaffolds, que apresentam macrogeometria semelhante ao tecido original,em textura e porosidade e direcionam o comportamento das células que serão semeadas. A recuperação da integridade anatômica e funcional de tecidos lesados garante a sobrevivência dos seres vivos e o tratamento de perdas extensas é desafiador, pois essa reposição no ser humano necessita estar estéril. Objetivo: Avaliar a eficiência da esterilização após a desmineralização e descelularização dos dentes viabilizando-os como scaffolds naturais. Método: As amostras foram submetidas a um tratamento com soluções desmineralizadoras/descelularizadoras e esterilizados. Foram usados: EDTA 28% para desmineralização, peróxido de hidrogênio 9%, detergente enzimático, em todos os grupos experimentais; G0- controle formol, , G1- esterilização com calor seco, G2-esterilização com calor úmido, G3- esterilização com óxido de etilileno, G4- controle/descelularizados, G5-esterilização por radiação Gama. A distribuição se deu dessa forma por ter sido aleatorizada. A evolução da desmineralização e descelularização foi acompanhada durante 12 semanas, por meio de pesagem, técnicas analíticas MEV (Microscopia eletrônica de Varredura), fotografia e radiografia. As amostras foram pesadas a cada sete dias para controle da perda de mineral. A esterilização recebeu o teste de esterilidade, colorimetria, microdureza, DRX, EDS, FRX e MEV. Os Resumo resultados receberam análise estatística de variância de Friedman, KruskalWallis, Teste do Qui-quadrado e Teste exato de Fisher. Foi fixado em 0,05 ou 5% o nível de rejeição da hipótese de nulidade. Conclusão: A desmineralização/ descelularização mostrou eficiente limpeza prévia ao processo de esterilização, mesmo não sendo capaz de eliminar todos os microrganismos, já os métodos de esterilização avaliados mostraram-se eficientes, porém algumas alterações no bioscaffold indicaram que ocorreram alterações de coloração e dureza.
Keywords Tissue Scaffold
Tissue Engineering
Demineralization
Engenharia Tecidual
Medicina Regenerativa
Desmineralização Do Dente
Desmineralização
Esterilização
Tecido Suporte
Language Portuguese
Date 2019-07-31
Research area Cultura E Terapia Celular E Células Tronco Aplicadas A Cirurgia
Knowledge area Regeneração Tecidual Ecto E Mesodérmica
Publisher Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP)
Extent 139 p.
Origin https://sucupira.capes.gov.br/sucupira/public/consultas/coleta/trabalhoConclusao/viewTrabalhoConclusao.jsf?popup=true&id_trabalho=7699208
Access rights Closed access
Type Thesis
URI https://repositorio.unifesp.br/handle/11600/59504

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