Estudo Das Vias De Sinalização Intracelular Envolvidas Na Atividade Citoprotetora Do Lopap (Lonomia Obliqua Prothrombin Activator Protease) E Peptídeos Derivados

Estudo Das Vias De Sinalização Intracelular Envolvidas Na Atividade Citoprotetora Do Lopap (Lonomia Obliqua Prothrombin Activator Protease) E Peptídeos Derivados

Author Carvalho, Cicilia De Autor UNIFESP Google Scholar
Advisor Tavassi, Ana Marisa Chudzinski Autor UNIFESP Google Scholar
Institution Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP)
Graduate program Ciências Biológicas (Biologia Molecular)
Abstract Lopap has been identified as one of the main toxins of the venom of Lonomia obliqua and possibly one of the responsible for the coagulopathy of consumption observed in the victims of poisoning by contact with this animal. From the transcriptome of the caterpillar bristles, th,is molecule was cloned and obtained in recombinant form (rLopap). It has been previously shown that Lopap, as well as rLopap, promote cytoprotection in addition to increasing the expression of adhesion molecules involved in the inflammatory processo Multiple alignment analysis of primary sequences and structural motifs indicated a similarity of 20 to 59% with other proteins belonging to the lipocalin family, proving the presence ofthree characteristic structural motifs that define this family. Considering the second structural motif (motif 2), two peptides were designed and synthesized, P2 (7 residues) and P4 (11 residues). The P4 peptide was able to maintain the viability of endothelial cells induced to apoptosis by serum deprivation, in addition to promoting increased expression of extracellular matrix molecules, such as collagen and fibronectin, thus indicating a possible role in tissue remodeling. A common amino acid sequence between P2 and P4 peptides was suggested as a signature sequence of lipocalins, whose molecular .. ,properties were investigated with the application of molecular modeling, computational chemistry and chemometrics methods. From this in silico evaluation the rational development of new peptides was established. After experimental validation the peptides that presented the best cytoprotective activity were elected to investigate the mechanism of this action.

O Lopap tem sido apontado como uma das principais toxinas do veneno de Lonomia obliqua e, possivelmente, um dos responsáveis pela coagulopatia de consumo observada nas vítimas do envenenamento pelo contato com este animal. A partir do transcriptoma das cerdas da lagarta, esta molécula foi clonada e obtida na forma • recombinante (rLopap). Demonstrou-se previamente que o Lopap, bem como rLopap, promovem citoproteção além de aumentar a expressão de moléculas de adesão envolvidas no processo inflamatório. Análises de alinhamento múltiplo de sequências primárias e de motivos estruturais indicaram similaridade de 20 a 59 % com outras proteínas que pertencem à família das lipocalinas, comprovando ainda a presença de três motivos estruturais característicos, que definem essa família. Considerando o segundo motivo estrutural (motivo 2), dois peptídeos foram desenhados e sintetizados, P2 (7 resíduos) e P4 (11 resíduos). O peptídeo P4 foi capaz de manter a viabilidade de células endoteliais induzidas à apoptose por deprivação de soro, além de promover aumento da expressão de moléculas integrantes da matriz extracelular, como colágeno e fibronectina, indicando assim uma possível atuação na remodelagem tecidual. Sugeriu-se, então, uma sequência comum .•de aminoácidos entre os peptídeos P2 e P4 como sequência-assinatura de lipocalinas, cujas propriedades moleculares foram investigadas com a aplicação de métodos de modelagem molecular, química computacional e quimiometria. A partir desta avaliação in silico estabeleceu-se o desenvolvimento racional de novos peptídeos. Após validação experimental os peptídeos que apresentaram melhor atividade citoprotetora foram eleitos para investigação do mecanismo desta ação
Keywords Biochemistry
Peptids
Lopap
Locallocines
Copoprotection
Bioquímica
Peptídeos
Lopap
Lipocalinas
Citoproteção
Language Portuguese
Date 2017-12-13
Research area Proteases E Inibidores De Proteases
Knowledge area Bioquimica
Publisher Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP)
Extent 51p.
Origin https://sucupira.capes.gov.br/sucupira/public/consultas/coleta/trabalhoConclusao/viewTrabalhoConclusao.jsf?popup=true&id_trabalho=5170164
Access rights Closed access
Type Thesis
URI http://repositorio.unifesp.br/handle/11600/50581

Show full item record




File

File Size Format View

There are no files associated with this item.

This item appears in the following Collection(s)

Search


Browse

Statistics

My Account