Estudo Morfológico Da Reparação Do Nervo Mentual De Ratos Após Utilização De Células-Tronco Mesenquimais Derivadas De Polpa Dental Humana E Laserterapia De Baixa Intensidade

Estudo Morfológico Da Reparação Do Nervo Mentual De Ratos Após Utilização De Células-Tronco Mesenquimais Derivadas De Polpa Dental Humana E Laserterapia De Baixa Intensidade

Author Sasaki, Robson Tetsuo Autor UNIFESP Google Scholar
Advisor Silva, Marcelo Cavenaghi Pereira Da Autor UNIFESP Google Scholar
Institution Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP)
Graduate program Biologia estrutural e funcional
Abstract Assess morphologically the regeneration of rats’ mental nerve after lesion by compression, followed by treatment with mesenchymal stem cells obtained from deciduous teeth stem cells (DTSC) and low level lasertherapy (LLLT) with gradual and constant doses. Methods: Eighty-four male Wistar rats were divided into five groups: PC – lesion by compression (positive control); NC – no lesion (negative control); GD – lesion by compression and lasertherapy with gradual dose; CD – lesion by compression and lasertherapy with constant dose and GS – lesion by compression and DTSC. After the surgery for compression of the nerve, GS received application of mesenchymal stem cells derived from human dental pulp of exfoliated teeth (5x105 cells in 4μL saline solution). One day after the surgery by compression, groups GD and CD underwent lasertherapy. The parameters adopted were 808nm wavelength, 100mW power for both groups, CD received treatment with 120J/cm2 for 33 seconds, while GD were submitted to the following protocol of application: 1st to 4th sessions: 80J/cm2 for 22 seconds; 5th to 8th sessions: 90 J/cm2 for 25 seconds; 9th to 12th sessions: 100 J/cm2 for 28 seconds; 13th to 16th sessions: 110 J/cm2 for 31 seconds; 17th to 20th sessions: 120 J/cm2 for 33 seconds. After euthanasia, the mental nerves were removed to be processed for analysis in transmission electron microscopy. Results: In the ultrastructural analysis of 20,000x magnification, it was observed that at 3 days the groups PC, CD, GD and GS presented extensive degeneration of myelin fibers, which occurred at 7 days only in the PC group. At 14 days, all groups showed increased regeneration of myelin fibers. At 21 days, CD and GD presented a similar morphology compared to NC group. In the 100,000x magnification, it was observed better lamellar organization of the myelin sheath at 7 days in GD and at 14 days in CD and GS, similar to the pattern observed in the NC group. The PC group presented extensive ultrastructural disorganization of myelin sheath lamellae in the first analyzed timespan study, presenting the beginning of organization similar to NC only at 21 days. At the end of treatment, there was no difference between the CD, GD and GS groups in this study. Conclusion: Both LLLT and the use of mesenchymal stem cells obtained from human dental pulp of exfoliated deciduous teeth had a positive effect on the mental nerve regeneration of rats after 14 days of treatment and at 21 days there was no morphological difference in ultrastructure between the experimental groups and the NC group.

Avaliar morfologicamente a regeneração do nervo mentual após lesão por compressão, seguido de tratamento com células mesenquimais obtidas de polpa dental humana de dentes decíduos exfoliados (DTSC) e laserterapia de baixa intensidade (LLLT) com dosagens gradual e constante. Métodos: Oitenta e quatro ratos machos Wistar foram distribuídos em cinco grupos de estudo: PC – lesão por compressão (controle positivo); NC – sem lesão (controle negativo); GD – lesão por compressão e laserterapia com dosagem gradual, CD – lesão por compressão e laserterapia com dosagem constante e GS – lesão por compressão e DTSC. Logo após a cirurgia para lesão por compressão, o grupo GS recebeu aplicação de células-tronco mesenquimais derivadas de polpa dental humana (5x105 células em 4 μL de soro fisiológico). Um dia após a cirurgia de lesão por compressão, os grupos GD e CD foram submetidos a laserterapia. Os parâmetros utilizados foram de 808nm de comprimento de onda, 100mW de potência para ambos os grupos, CD recebeu tratamento com 120J/cm2 por 33 segundos, enquanto GD foi submetido ao seguinte protocolo de aplicação: 1ª a 4ª sessão: 80 J/cm2 por 22 segundos; 5ª a 8ª sessões: 90 J/cm2 por 25 segundos; 9ª a 12ª sessões: 100 J/cm2 por 28 segundos; 13ª a 16ª sessões: 110 J/cm2 por 31 segundos; 17ª a 20ª sessões: 120 J/cm2 por 33 segundos. Após eutanásia, os nervos mentuais foram removidos para serem processados para análises em microscopia eletrônica de transmissão. Resultados: Na análise ultraestrutural com aumento de 20.000x, foi observado que no tempo 3 dias os grupos PC, CD, GD e GS apresentaram extensa degeneração de fibras mielínicas, que ocorreu no tempo 7 dias apenas no grupo PC. No tempo 14 dias, todos os grupos apresentaram aumento da regeneração de fibras mielínicas. No tempo 21 dias, CD e GD apresentaram uma morfologia similar ao grupo NC. No aumento de 100.000x foi observada melhor organização lamelar da bainha de mielina no tempo 7 dias em GD e 14 dias em CD e GS, similar ao padrão observado no grupo NC. O grupo PC apresentou extensa desorganização estrutural de lamelas da bainha de mielina no primeiro tempo analisado, apresentando um início de organização similar ao NC apenas no tempo 21 dias. Ao final do tratamento, não houve diferença entre os grupos CD, GD e GS neste estudo. Conclusões: Tanto LLLT como o uso de células mesenquimais obtidas de polpa dental humana de dentes decíduos exfoliados apresentaram efeito positivo na regeneração de nervo mentual de ratos após 14 dias de tratamento e, aos 21 dias, não houve diferença morfológica na ultraestrutura entre os grupos experimentais e o grupo NC.
Keywords Peripheral Nerve Injuries
Low-Level Light Therapy
Cell And Tissue-Based Therapy
Traumatismos Dos Nervos Periféricos
Terapia Com Luz De Baixa Intensidade
Terapia Baseada Em Transplante De Células E Tecidos
Language Portuguese
Date 2017-03-31
Research area Biologia Estrutural E Funcional Aplicada
Knowledge area Biologia Celular E Molecular
Publisher Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP)
Extent 44p.
Origin https://sucupira.capes.gov.br/sucupira/public/consultas/coleta/trabalhoConclusao/viewTrabalhoConclusao.jsf?popup=true&id_trabalho=5617764
Access rights Closed access
Type Thesis
URI http://repositorio.unifesp.br/handle/11600/50226

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