Caracterização do potencial angiogênico de células primárias isoladas da microvasculatura pulmonar murina

Caracterização do potencial angiogênico de células primárias isoladas da microvasculatura pulmonar murina

Author Figueiredo, Caio Andreeta Autor UNIFESP Google Scholar
Advisor Carmona, Adriana Karaoglanovic Carmona Autor UNIFESP Google Scholar
Institution Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP)
Graduate program Ciências Biológicas (Biologia Molecular)
Abstract Angiogenesis is a vascular process through which new blood vessels are formed from pre-existing vessels. This process accounts for disability associated with diseases such as psoriasis, macular degeneration, diabetic retinopathy, rheumatoid arthritis and cancer. The molecular mechanisms of several substances that stimulate or inhibit angiogenesis have been analyzed in endothelial cells, performing in vitro assays using isolated cells from microvasculature. However, this experimental approach has been considered controversial due to the difficulty in the isolation techniques that reduce the numbers of viable cells, impairing the expression of specific markers and affecting the characterization of the isolated cells. Furthermore, endothelial cells in culture frequently loss their phenotype and show alterations in the activation, growing and surface the pattern of antigens expression. The aim of this work was isolate and characterize cells from the mice lung microvasculature to evaluate their capacity to induce angiogenesis using specific in vitro assays. Moreover, we analyzed the expression patterns of the surface markers already described to characterize this particular cell type. We also compared the phenotypes of cells growing through different passages. We obtained primary culture cells showing angiogenic and not angiogenic phenotypes. Angiogenic cells were able to form tubular capillary-like structures after several passages. Although this ability was significantly reduced after each passage, a differential behavior was not evident in the pattern of the surface markers analyzed by cytometry and gene expression. Taken together, these results show the importance of improving the methods and approaches to isolate endothelial cells as well as open perspectives in understanding physiological and pathological angiogenesis, contributing to the development of new drugs and improving therapeutic strategies.

Condições fisiológicas e patológicas, sendo responsável por incapacitação associada a doenças como psoríase, degeneração macular, retinopatia diabética, artrite reumatoide e câncer. Os efeitos moleculares de várias substâncias pró- e antiangiogênicas têm sido analisados em células endoteliais, a partir de ensaios in vitro com células isoladas de microvasculatura. Entretanto, esse isolamento é pouco difundido devido à dificuldade de caracterização dessas células além de algumas técnicas utilizadas causarem danos a elas, reduzindo a viabilidade celular e a expressão de marcadores específicos. Além disso, células endoteliais em cultura começam a perder seu fenótipo específico e sofrem alterações no estado de ativação, na expressão de antígenos de superfície e no crescimento. O nosso objetivo foi isolar e caracterizar células da microvasculatura pulmonar murina e verificar o potencial angiogênico dessas células através de ensaios de angiogênese in vitro. Além disso, foram analisados perfis de expressão de marcadores de superfície descritos para caracterizar células endoteliais. Foram comparados também os fenótipos obtidos com células obtidas de diferentes passagens. Obtivemos culturas de células primárias que apresentaram fenótipos angiogênico e não-angiogênico. Células angiogênicas foram capazes de formar estruturas tubulares capilar-símile após várias passagens. Apesar dessa habilidade ter diminuído a cada passagem, um comportamento diferencial não ficou evidenciado no perfil de marcadores de superfície analisados por citometria e expressão gênica. Esses resultados evidenciam a importância de melhorar os métodos e abordagens utilizados para isolar células endoteliais, assim como abrem perspectivas para a compreensão da angiogênese fisiológica e patológica, contribuindo para o desenvolvimento de novas drogas e estratégias terapêuticas.
Keywords angiogênese
células endoteliais
microvasculatura
cultura primária
marcadores endoteliais
Language Portuguese
Date 2015-11-27
Published in FIGUEIREDO, Caio Andreeta. Caracterização do potencial angiogênico de células primárias isoladas da microvasculatura pulmonar murina. 2015. 77 f. Dissertação (Mestrado) - Escola Paulista de Medicina, Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP), São Paulo, 2015.
Research area Bioquímica
Knowledge area Ciências biológicas
Publisher Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP)
Extent 77 p.
Origin https://sucupira.capes.gov.br/sucupira/public/consultas/coleta/trabalhoConclusao/viewTrabalhoConclusao.jsf?popup=true&id_trabalho=2661857
Access rights Closed access
Type Dissertation
URI http://repositorio.unifesp.br/handle/11600/48140

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