Mecanismos moleculares relacionados a manutenção da prenhez após privação de sono paradoxal a pré-implantação em camundongos

Mecanismos moleculares relacionados a manutenção da prenhez após privação de sono paradoxal a pré-implantação em camundongos

Alternative title Molecular mechanisms related to pregnancy maintenance after paradoxical sleep deprivation during preimplantation in mice
Author Calegare, Bruno Frederico Aguilar Autor UNIFESP Google Scholar
Advisor D'Almeida, Vania Autor UNIFESP Google Scholar
Institution Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP)
Graduate program Psicobiologia - EPM
Abstract Entender esse fenomeno, investigamos mecanismos moleculares associados a essa diminuicao. Para tanto, camundongos femeas Swiss foram submetidas ao cruzamento e apos confirmacao da prenhez, foram distribuidas nos grupos: privados de sono (PS) pelo metodo das plataformas multiplas por 48 ou 72 h e seus respectivos controles (CT), que puderam dormir livremente. Apos o procedimento experimental as femeas foram submetidas a eutanasia. O sangue coletado para analises bioquimicas, o utero e as tubas uterinas foram lavados para coleta de embrioes. Os uteros foram analisados quanto a expressao de genes relacionados a implantacao embrionaria. Foi feita analise da expressao de genes relacionados ao desenvolvimento e metilacao global do DNA dos embrioes apos PS por 72 h. Embrioes de maes PS por 48 h foram avaliados quanto a proteinas relacionadas ao ciclo celular. Comparadas ao grupo CT, as femeas PS por 72 h nao tiveram o peso corporal alterado, mas tiveram diminuicao do peso do utero absoluto (fresco) e de seu peso relativo ao peso do animal. Observamos aumento das concentracoes plasmaticas da corticosterona e testosterona, diminuicao das concentracoes plasmaticas de progesterona e LH, e nao observamos alteracoes nas concentracoes plasmaticas de 17β-estradiol e FSH apos PS por 72 h. Nao encontramos alteracoes na expressao genica uterina apos PS por 72h. Os blastocistos do grupo PS nao tiveram alteracoes na expressao genica e metilacao global do DNA, sugerindo que estes embrioes poderiam se desenvolver. No entanto, encontramos todos os embrioes no estagio de morula ainda nas tubas uterinas em algumas maes PS por 72 h no dia gestacional 3,5, sugerindo que estes serao os embrioes que nao iriam se desenvolver e implantar. Apos PS por 48 h nao encontramos alteracoes quanto ao tamanho ou numero de celulas dos embrioes, assim como na expressao de proteinas relacionadas ao ciclo celular. Porem, encontramos alteracao na disposicao das celulas de todos os embrioes apos privacao de sono por 48 h em algumas maes, sendo mais dispersas quando comparadas as celulas dos embrioes do grupo CT. Assim, os dados encontrados sobre as maes e blastocistos analisados apos 72 h de PS devem corresponder aos que irao se implantar e desenvolver, enquanto a diminuicao da manutencao da prenhez apos PS parece ser causada pela falta de desenvolvimento do embriao, provavelmente devida a dispersao das celulas embrionarias

During pregnancy two-third of women consider their sleep to be abnormal. A previous study of our group showed that sleep deprivation during preimplantation lead to a decreased pregnancy maintenance and, in order to understand these phenomena, we aimed to investigate the molecular mechanisms associated to it. Swiss female mice were mated and when pregnancy was verified, the animals were assigned into these groups: paradoxical sleep deprivation by multiple platforms for 48 or 72 h (PS) and a control (CT) with normal sleep. After the experimental procedure, the animals were euthanized and the blood was collected for biochemical measurements. The uterus was harvested, weighted and either frozen in dry ice or washed to collect the embryos. The fallopian tubes were also washed to collect the embryos. Uterus was analyzed regarding expression of genes related to implantation. We analyzed the expression of genes related to development and global DNA methylation of embryos from group PS for 72 h. Embryos from group PS for 48 h were analyzed concerning proteins from cell cycle. Compared to CT group, PS mice showed no alteration on body weight, lighter wet and relative uterus weight, increased plasma concentrations of corticosterone and testosterone, decreased plasma concentrations of progesterone and LH, no alteration in plasma concentrations of 17β-estradiol and FSH, and no alteration on uterus gene expression. The blastocysts from PS group did not show alterations in gene expression and global DNA methylation. Moreover, we found undeveloped embryos at morula stage at the fallopian tubes on gestational day 3.5 on PS group. After PS for 48 h we found no alterations on embryo size and cells count, as well as in the expression of proteins related to cell cycle. But we found an alteration on embryos cell aggregation, only from some PS mothers being more dispersed than those from CT group. The mothers and embryos analyzed after 72 h of PS probably correspond to the embryos that will be able to implant and develop. The decreased pregnancy maintenance found after PS is related to the embryos underdevelopment, probably due the cells dispersion.
Keywords Privação de sono
Prenhez
Expressão gênica
Repressão epigenética
Camundongos
Language Portuguese
Sponsor Associação Fundo de Incentivo à Psicofarmacologia (AFIP)
Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES)
Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq)
Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)
Grant number CNPq: 472872/2011-7
FAPESP: 2010/00245-5
Date 2014
Published in CALEGARE, Bruno Frederico Aguilar. Mecanismos moleculares relacionados a manutenção da prenhez após privação de sono paradoxal a pré-implantação em camundongos. 2014. 121 f. Tese (Doutorado em Ciências) - Escola Paulista de Medicina, Universidade Federal de São Paulo. São Paulo, 2014.
Publisher Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP)
Extent 120 p.
Access rights Open access Open Access
Type Thesis
URI http://repositorio.unifesp.br/handle/11600/23077

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Name: Tese-14335.pdf
Size: 2.140Mb
Format: PDF
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