Avaliação do perfil de expressão de microRNAs como marcador de diagnóstico de metástases cervicais em pacientes com Carcinoma Epidermóide de Cabeça e Pescoço

Avaliação do perfil de expressão de microRNAs como marcador de diagnóstico de metástases cervicais em pacientes com Carcinoma Epidermóide de Cabeça e Pescoço

Alternative title Evaluation of the expression profile of microRNAs as a marker for the diagnostic of cervical metastases in patients with Head and Neck Squamous Cell Carcinoma
Author De Carvalho, Ana Carolina Autor UNIFESP Google Scholar
Advisor Vettore, André Luiz Autor UNIFESP Google Scholar
Institution Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP)
Graduate program Ciências Biológicas (Biologia Molecular) – São Paulo
Abstract A presenca de doenca metastatica em linfonodos cervicais de pacientes com carcinoma epidermoide de cabeca e pescoco (CECP) e um dos determinantes mais importantes na escolha da terapia e na determinacao do prognostico. Assim, o estadiamento correto de metastases em linfonodos regionais e critico para o sucesso do controle loco-regional da doenca, resposta ao tratamento e, desta forma, influencia a sobrevida global destes pacientes. O estadiamento clinico realizado na rotina nem sempre e eficiente, pois pode nao detectar metastases ocultas e a avaliacao patologica poscirurgica dos linfonodos ressecados por H&E nao e sensivel na deteccao de pequenos depositos metastaticos. Assim, existe uma necessidade urgente de marcadores de diagnostico e tecnicas que possibilitem uma deteccao rapida e precisa de celulas metastaticas em nodulos linfaticos cervicais de forma a guiar os medicos na escolha da terapia mais adequada para estes pacientes. MicroRNAs sao candidatos promissores para marcadores de diagnostico uma vez que: (1) desempenham papel em muitas vias envolvidas em metastase tumoral; (2) sao relatados como tendo expressao tumor e tecido especifica; (3) sua expressao e avaliada usando a tecnica sensivel e rapida de qRT-PCR; e (4) sao adequados para serem avaliadas em tecido incluido em parafina e fluidos corporais. Assim, apresentamos neste trabalho a avaliacao de microRNAs como marcadores na deteccao de celulas metastaticas em linfonodos de pacientes com CECP. Um screening inicial usando PCR-array comparou a expressao de 664 microRNAs entre linfonodos metastaticos e nao-metastaticos de 6 pacientes com CECP e apos sucessivas analises, 25 microRNAs foram identificados como diferencialmente expressos. Quatro microRNAs foram selecionados para posterior validacao usando qRT-PCR em linfonodos de 48 pacientes (23 naometastaticos, 18 com macrometastases, 5 com micrometastases e 2 com celulas tumorais isoladas). Todos os microRNAs mostraram 100% de especificidade. Os microRNAs miR-200a e miR-200c apresentaram altos niveis de sensibilidade (76% e 88%), mas nao tiveram sucesso na deteccao de pequenos depositos metastaticos (0% de celulas tumorais isoladas e 40% e 80%, respectivamente, de casos com micrometastases). Por outro lado, os microRNAs miR-203 e miR-205 foram uficientemente sensiveis para identificar todas as amostras metastaticas, mostrando niveis de acuracia, valores preditivos positivos e negativos de 100%, assim como valores de AUC de 1,0. Alem disto, estes microRNAs foram capazes de detectar a presenca de celulas metastaticas mesmo apos processamento do linfonodo inteiro e em amostras colhidas atraves de puncao aspirativa por agulha fina (PAAF). Estes resultados mostram a viabilidade do uso de microRNAs como marcadores de diagnostico de metastase cervical em pacientes com CECP que podem, potencialmente, ser avaliados usando varias abordagens em diferentes momentos, como no pre-tratamento atraves do diagnostico utilizando biopsias de PAAF, no intra-operatorio atraves de biopsia do linfonodo sentinela e apos a cirurgia como uma ferramenta auxiliar para a avaliacao histopatologica, ajudando na escolha do tratamento destes pacientes desde o tratamento inicial ate a terapia adjuvante
Keywords Humanos
Neoplasias de Cabeça e Pescoço
Carcinoma de Células Escamosas
MicroRNAs
Metástase Linfática
Diagnóstico
Humanos
Language Portuguese
Sponsor Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)
Grant number FAPESP: 10/15949-8
Date 2013
Published in DE CARVALHO, Ana Carolina. Avaliação do perfil de expressão de microRNAs como marcador de diagnóstico de metástases cervicais em pacientes com Carcinoma Epidermóide de Cabeça e Pescoço. 2013. 106 f. Tese (Doutorado em Ciências) – Escola Paulista de Medicina, Universidade Federal de São Paulo. São Paulo, 2013.
Publisher Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP)
Extent 88 p.
Access rights Closed access
Type Thesis
URI http://repositorio.unifesp.br/handle/11600/22820

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Name: Tese-14012.pdf
Size: 1.744Mb
Format: PDF
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