CGRP e SP em cultura de fibroblastos de queloide

CGRP e SP em cultura de fibroblastos de queloide

Alternative title CGRP and SP in cultured keloid fibroblasts
Author Tucci-Viegas, Vanina Monique Autor UNIFESP Google Scholar
Advisor Hochman, Bernardo Autor UNIFESP Google Scholar
Institution Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP)
Graduate program Cirurgia translacional – São Paulo
Abstract Introdução: Sabendo-se que o estímulo neurogênico de origem nociceptiva é considerado o deflagrador primário do processo de cicatrização da pele, que o CGRP e SP aumentam a proliferação de fibroblastos in vitro, e diante da falta de estudos correlacionando CGRP, SP e p53 e apoptose em queloide torna-se importante investigar se os neuropeptídeos da pele podem influenciar a expressão de p53 e a apoptose no queloide. Uma possível associação entre neuropeptídeos e o gene p53 poderia representar um novo caminho para um melhor entendimento fisiopatogênico das cicatrizes patológicas fibroproliferativas e, por conseguinte, o advento de tratamentos mais específicos. Objetivo: Investigar a expressão do gene p53 e o índice apoptótico em culturas de fibroblastos de queloide, submetidos à ação dos neuropeptídeos CGRP e SP. Métodos: Foram cultivados fibroblastos de queloide em meio de cultura com adição de CGRP e SP, e controle. O índice apoptótico, e o ciclo celular foram determinados por citometria de fluxo e a marcação de proteínas-chave da apoptose por espectrofotometria. A atividade celular foi avaliada ao longo do tempo e em períodos determinados, por MTT. A morfologia celular foi avaliada por microscopia confocal. Resultados: Foi padronizado um modelo de explante baseado nas diferenças biológicas das regiões específicas do queloide. A atividade celular em fibroblastos de queloide variou ao longo do tempo, sendo diferente entre os subgrupos celulares mas similar dentro de um mesmo subgrupo, mas não foi afetada pela adição de CGRP, SP ou CGRP+SP. Fibroblastos de queloide das regiões periférica e central apresentaram maior expressão de p53 do que fibroblastos da pele adjacente ao queloide, de cicatriz normotrófica ou de pele normal, adjacente à cicatriz normotrófica. CGRP, SP e CGRP+SP provocaram uma diminuição na expressão de p53 em fibroblastos de queloide das regiões periférica e central em relação aos outros subgrupos estudados. Conclusão: CGRP, SP e CGRP+SP provocaram uma diminuição na expressão de p53 em fibroblastos de queloide.

Introduction: Given that nociceptive neurogenic stimulation is considered the primary trigger of the healing process in the skin, that CGRP and SP increase fibroblast proliferation in vitro, and given the lack of studies correlating CGRP, SP p53 and apoptosis in keloid, it becomes important to investigate whether skin neuropeptides can influence the expression of p53 and apoptosis in keloid. A possible association between neuropeptides and p53 gene could represent a new path to a better physiopathogenic understanding of pathological fibroproliferative scars and, therefore, the advent of more specific treatments. Objective: To investigate the expression of p53 gene and the apoptotic index in keloid fibroblast cultures exposed to the action of the neuropeptides CGRP and SP. Methods: Keloid fibroblasts were grown in culture medium with or without the addition of CGRP and SP. The apoptotic index and cell cycle were determined by flow cytometry and the labeling of apoptosis key proteins was done by spectrophotometry. Cell activity was evaluated over time by MTT. Cell morphology was analyzed by confocal microscopy. Results: An explant model for keloid fibroblast isolation and culture based on the biological differences of its specific regions was standardized. Cellular activity in keloid fibroblasts varied over time and was different among the fibroblasts subgroups but similar within the same subgroup, however was not affected by the addition of CGRP, SP or SP + CGRP. Keloid fibroblasts derived from peripheral and central regions had higher p53 expression than fibroblasts derived from the skin adjacent to the keloid scar, fibroblasts derived from normotrophic scar or from normal skin adjacent to the normotrophic scar. CGRP, SP and SP + CGRP caused a decrease in p53 expression in keloid fibroblasts of peripheral and central regions compared to all other subgroups studied. Conclusion: CGRP, SP and SP + CGRP caused a decrease in p53 expression in keloid fibroblasts.
Keywords Queloide
Fibroblastos
Peptídeo relacionado com gene de calcitonina
Apoptose
Genes p53
Células cultivadas
Humanos
Language Portuguese
Sponsor Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES)
Date 2011
Published in TUCCI-VIEGAS, Vanina Monique. CGRP e SP em cultura de fibroblastos de queloide. 2011. 153 f. Tese (Doutorado em Ciências) - Escola Paulista de Medicina, Universidade Federal de São Paulo, São Paulo, 2011.
Publisher Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP)
Extent 153 f.
Access rights Open access Open Access
Type Thesis
URI http://repositorio.unifesp.br/handle/11600/21613

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Name: Publico-21613.pdf
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Format: PDF
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