Método da citometria de imagem em esfregaço de melanoma cutâneo: material a fresco versus conservado em nitrogênio liquido

Método da citometria de imagem em esfregaço de melanoma cutâneo: material a fresco versus conservado em nitrogênio liquido

Alternative title Image cyrometry of skin melanomas: comparison between fresh and frozen material
Author Haddad, Alessandra Autor UNIFESP Google Scholar
Advisor Santos, Ivan Dunshee de Abranches Oliveira Autor UNIFESP Google Scholar
Institution Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP)
Graduate program Cirurgia Translacional – São Paulo
Abstract A caracterizacao do potencial evolutivo biologico dos melanomas cutaneos e um problema importante e de dificil abordagem na pratica clinica e anatomopatologica. A dificuldade e ainda maior considerando-se a grande variabilidade no curso de melanomas aparentemente semelhantes. A determinacao quantitativa do ADN pela citometria de imagem baseia-se no conhecimento de que uma alteracao no conteudo dos cromossomas (aneuploidia) verificada pela analise da ploidia, indice de proliferacao e padrao da cromatina nuclear, correlaciona-se frequentemente com crescimento celular tumoral podendo fornecer dados complementares quanto a sua agressividade, prognostico, e consequentemente a sobrevida de pacientes portadores destas neoplasias. O objetivo proposto foi analisar pelo sistema SAMBA 4000, esfregacos de 17 melanomas cutaneos (primarios, metastaticos, recidiva) obtidos de material a fresco comparando-os com os obtidos apos a conservacao do mesmo material em nitrogenio liquido a -1960 C. De cada fragmento foram feitos tres esfregacos do material a fresco e tres apos descongelamento do mesmo em temperatura ambiente na presenca de solucao tampao. Todas as laminas foram fixadas e coradas pelo metodo de FEULGEN tendo como corante o reagente de SCHIFF. A leitura de 200 nucleos foi possivel em todos casos de material a fresco e 8 casos do material descongelado. O resultado foi comparado entre os dois metodos de obtencao de material em termos de medias de 15 parametros matematicos, analise estatistica monovariada e pelo teste t de STUDENT dos dados encontrados. Nao houve diferenca estatisticamente significante na area nuclear, calculo da ploidia, fracao da Fase S e no coeficiente de curtose em ambas amostras, enquanto diferencas estatisticamente significantes foram encontradas nos parametros densitometricos coeficiente de assimetria e variancia das densidades opticas e em todos os parametros de avaliacao textural da cromatina. Proposicoes para otimizacao do uso de material de melanomas cutaneos crio preservados foram sugeridas e consideracoes sobre as alteracoes celulares que ocorrem durante o processo de congelamento e descongelamento foram abordadas. A conservacao do material de melanoma cutaneo em nitrogenio liquido para uso em citometria de imagem foi possivel necessitando no entanto melhor padronizacao
Keywords Humanos
Citometria por Imagem
Citofotometria
Melanoma
Aneuploidia
Humanos
Language Portuguese
Date 2000
Published in São Paulo: [s.n.], 2000. 141 p. ilusgraf.
Publisher Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP)
Extent 141 p.
Access rights Closed access
Type Dissertation
URI http://repositorio.unifesp.br/handle/11600/18102

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